ڊگھي پيپٽائيڊ سنٿيسس جا مسئلا ۽ حل

حياتياتي تحقيق ۾، هڪ ڊگهي تسلسل سان polypeptides عام طور تي استعمال ٿيندا آهن.ترتيب ۾ 60 کان وڌيڪ امينو اسيد سان گڏ پيپٽائڊس لاءِ، جيني اظهار ۽ SDS-PAGE عام طور تي انهن کي حاصل ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي.بهرحال، اهو طريقو هڪ ڊگهو وقت وٺندو آهي ۽ حتمي پيداوار جي الڳ ٿيڻ جو اثر سٺو ناهي.

ڊگھي پيپٽائڊ جي جوڙجڪ لاءِ چيلنجز ۽ حل

ڊگھي پيپٽائڊس جي ٺهڻ ۾، اسان کي هميشه هڪ مسئلي سان منهن ڏيڻو پوي ٿو، اهو آهي ته، ڪنڊينسيشن جي رد عمل جي اسٽريڪ رڪاوٽ، سنٿيسس ۾ تسلسل جي واڌ سان وڌي ٿي، ۽ رد عمل کي مڪمل ڪرڻ لاءِ رد عمل جي وقت کي ترتيب ڏيڻ جي ضرورت آهي.تنهن هوندي، ردعمل جو وقت ڊگهو آهي، وڌيڪ ضمني اثرات پيدا ٿين ٿا، ۽ ٽارگيٽ پيپٽائڊ جو هڪ حصو ٺهيل آهي.اهڙا رهجي ويا آهن - گھٽ پيپٽائڊ زنجير ڊگھي پيپٽائڊ سنٿيسس ۾ پيدا ٿيندڙ اھم نجاست آھن.تنهن ڪري، ڊگھي پيپٽائڊ جي ٺهڻ ۾، اهم مسئلو اسان کي ختم ڪرڻ گهرجي، اعلي معيار جي رد عمل جي حالتن ۽ رد عمل جي طريقن کي ڳولڻ لاء، جيئن ته امينو اسيد کنڊشن رد عمل کي وڌيڪ جامع ۽ مڪمل بڻائي سگهجي.ان کان علاوه، رد عمل جي وقت کي گھٽايو، ڇاڪاڻ ته ردعمل جو وقت جيترو ڊگهو ٿيندو، اوترو وڌيڪ غير ڪنٽرول ٿيل ضمني ردعمل، وڌيڪ پيچيده ضمني پيداوار.تنهن ڪري، هيٺيان ٽي نقطا اختصار ڪيا ويا آهن:

مائڪرو ويڪرو سنٿيسس استعمال ڪري سگھجي ٿو: ڪجھ امينو اسيدن لاءِ جيڪي ٺاھڻ جي عمل ۾ سامھون آھن جن کي ضم ٿيڻ آسان نه آھي، مائڪرو ويڪرو سنٿيسس استعمال ڪري سگھجي ٿو.ھن طريقي سان قابل ذڪر نتيجا آھن، ۽ رد عمل جي وقت کي تمام گھٽ گھٽائي ٿو، ۽ ٻن مکيه شين جي ٺاھڻ کي گھٽائي ٿو.

فريگمينٽ سنٿيسس جو طريقو استعمال ڪري سگھجي ٿو: جڏهن ڪجهه پيپٽائيڊس کي عام سنٿيسس طريقن سان ٺهڪائڻ ڏکيو هوندو آهي ۽ صاف ڪرڻ آسان نه هوندو آهي، ته اسان پيپٽائيڊ جي هڪ خاص حصي ۾ ڪيترن ئي امينو اسيدن جي پوري ڪنڊينسيشن کي مجموعي طور تي پيپٽائيڊ زنجير تائين اپنائڻ ڪري سگهون ٿا.اهو طريقو پڻ ڪيترن ئي مسئلن کي حل ڪري سگهي ٿو ترکیب ۾.

Acylhydrazide synthesis استعمال ڪري سگهجي ٿو: peptides جي acylhydrazide synthesis N-terminal Cys peptide ۽ C-terminal polypeptide hydrazide ڪيميائي سليڪٽي رد عمل جي ٺهڻ جو هڪ طريقو آهي ايمائيڊ بانڊ جي ٺهڻ جي وچ ۾ پيپٽائيڊ بانڊنگ جو طريقو حاصل ڪرڻ لاءِ.peptide زنجير ۾ Cys جي پوزيشن جي بنياد تي، هي طريقو سڄي پيپٽائڊ زنجير کي ڪيترن ئي ترتيبن ۾ ورهائي ٿو ۽ انهن کي ترتيب سان ترتيب ڏئي ٿو.آخرڪار، ٽارگيٽ پيپٽائڊ مائع-مرحلي ڪنڊيشن ردعمل ذريعي حاصل ڪئي وئي آهي.اهو طريقو نه رڳو ڊگھي پيپٽائڊ جي ٺهڪندڙ وقت کي گھٽائي ٿو، پر حتمي پيداوار جي پاڪائي کي پڻ وڌائي ٿو.

ڊگھي peptide صفائي

ڊگھي پيپٽائڊس جي خصوصيت ناگزير طور تي خام پيپٽائڊس جي پيچيده اجزاء جي ڪري ٿي.تنهن ڪري، اهو پڻ هڪ چئلينج آهي ته HPLC پاران ڊگهي پيپٽائڊس کي صاف ڪرڻ.polypeptide صاف ڪرڻ جي عمل جي amyloid سيريز، تجربو جو تمام گهڻو جذب ۽ ڪاميابي سان ڊگهي peptide جي صفائي ۾ استعمال ڪيو.نئين سامان کي اپنائڻ سان، گھڻن صاف ڪرڻ واري نظام جي ميلاپ، بار بار الڳ ڪرڻ ۽ ٻين تجربن جي طريقن سان، ڊگھي پيپٽائڊ صاف ڪرڻ جي ڪاميابي جي شرح تمام بھتر ٿي وئي.