HPLC جي ناڪامين ۽ حلن جو سڀ کان وڏو ڪارڻ

هڪ اعلي صحت واري اوزار جي طور تي، HPLC آساني سان ڪجهه مشڪلاتي ننڍڙن مسئلن کي جنم ڏئي سگهي ٿو جيڪڏهن اهو استعمال دوران صحيح طريقي سان هلائڻ نه آهي.سڀ کان وڌيڪ عام مسئلن مان هڪ آهي ڪالمن کمپريشن مسئلو.ناقص ڪروميٽوگراف کي جلدي ڪيئن حل ڪجي.HPLC سسٽم بنيادي طور تي هڪ ذخيري جي بوتل، هڪ پمپ، هڪ انجنيئر، هڪ ڪالمن، هڪ ڪالمن جي درجه حرارت چيمبر، هڪ ڊيڪٽر ۽ ڊيٽا پروسيسنگ سسٽم تي مشتمل آهي.سڄي سسٽم لاءِ، ٿنڀا، پمپ ۽ ڊيڪٽر اهم جزا ۽ مکيه جڳهون آهن جيڪي مسئلن جو شڪار آهن.

ڪالمن جي دٻاء جو ڪنجي اهو علائقو آهي جيڪو HPLC استعمال ڪرڻ وقت ويجهي ڌيان جي ضرورت آهي.ڪالمن جي دٻاء جي استحڪام سان ويجهي سان لاڳاپيل آهي ڪروميٽگرافڪ چوٽي جي شڪل، ڪالمن جي ڪارڪردگي، علحدگيء جي ڪارڪردگي ۽ برقرار رکڻ واري وقت.ڪالمن جي پريشر جي استحڪام جو مطلب اهو ناهي ته پريشر جي قيمت هڪ مستحڪم قدر تي مستحڪم آهي، بلڪه اهو آهي ته دٻاء جي وهڪري جي حد 345kPa يا 50PSI جي وچ ۾ آهي (جڏهن ڪالمن جو دٻاء مستحڪم آهي ۽ دير سان تبديل ٿيندڙ گريجوئيٽ ايليوشن جي استعمال جي اجازت ڏئي ٿو).تمام گهڻو يا تمام گهٽ دٻاء هڪ ڪالمن پريشر مسئلو آهي.

HPLC جي ناڪامين ۽ حلن جو سڀ کان وڏو ڪارڻ

1، هاء پريشر HPLC جي استعمال ۾ سڀ کان عام مسئلو آهي.هن جو مطلب آهي اوچتو دٻاء ۾ اضافو.عام طور تي، هيٺيان سبب آهن: (1) عام طور تي، اهو وهڪرو چينل جي رڪاوٽ جي سبب آهي.هن نقطي تي، اسان کي ان جو جائزو وٺڻ گهرجي.هڪپهرين، ويڪيوم پمپ جي انٽ کي ڪٽي ڇڏيو.ان موقعي تي، PEEK ٽيوب مائع سان ڀريو ويو هو ته جيئن PEEK ٽيوب سالوينٽ بوتل کان ننڍي هئي اهو ڏسڻ لاءِ ته ڇا مائع پنهنجي مرضي سان ٽٽي رهيو هو.جيڪڏهن مائع نه ٽٽي رهيو آهي يا دير سان ٽٽي رهيو آهي، سالوينٽ فلٽر سر بلاڪ ڪيو ويو آهي.علاج: 30 سيڪڙو نائٽرڪ ايسڊ ۾ اڌ ڪلاڪ لاءِ ٻوڙي ڇڏيو ۽ الٽراپور پاڻي سان ڌوئي ڇڏيو.جيڪڏهن مائع بي ترتيب سان ٽٽي ٿو، سالوينٽ فلٽر سر عام آهي ۽ جانچيو پيو وڃي؛ب.پرج والو کي کوليو ته جيئن موبائيل جو مرحلو ڪالمن مان گذري نه وڃي، ۽ جيڪڏهن دٻاءُ گهڻو گهٽ نه ٿيو ته فلٽر وائيٽ هيڊ بلاڪ ڪيو ويو آهي.علاج: فلٽر ٿيل وائيٽ هيڊز کي هٽايو ويو ۽ اڌ ڪلاڪ لاءِ 10٪ isopropanol سان سونيڪ ڪيو ويو.فرض ڪيو ته پريشر 100PSI کان هيٺ اچي ٿو، فلٽر ٿيل وائيٽ هيڊ عام آهي ۽ جانچيو پيو وڃي.ج.ڪالمن جي نڪرڻ واري پڇاڙي کي هٽايو، جيڪڏهن دٻاء گهٽ نه ٿئي، ڪالمن کي بند ڪيو ويندو.علاج: جيڪڏهن اهو هڪ بفر لوڻ جي رڪاوٽ آهي، 95٪ ڌوء جيستائين دٻاء معمول نه آهي.جيڪڏهن رڪاوٽ ڪجهه وڌيڪ محفوظ مواد جي ڪري آهي، موجوده موبائيل مرحلي کان وڌيڪ مضبوط وهڪري کي عام دٻاء ڏانهن جلدي ڪرڻ لاء استعمال ڪيو وڃي.جيڪڏهن مٿي ڏنل طريقي مطابق ڊگهي عرصي تائين صفائي جو دٻاءُ گهٽ نه ٿئي ته ڪالمن جي انليٽ ۽ آئوٽ ليٽ کي ان جي ابتڙ اوزار سان ڳنڍڻ سمجهي سگهجي ٿو، ۽ ڪالمن کي موبائيل مرحلي سان صاف ڪري سگهجي ٿو.هن وقت، جيڪڏهن ڪالمن جو دٻاء اڃا به گهٽ نه ڪيو ويو آهي، ڪالمن جي داخل ٿيڻ واري پليٽ کي صرف تبديل ڪري سگهجي ٿو، پر هڪ ڀيرو آپريشن سٺو نه آهي، اهو آسان آهي ته ڪالمن جي اثر کي گھٽائڻ لاء، تنهنڪري گهٽ استعمال ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو.مشڪل مسئلن لاء، ڪالمن جي متبادل سمجهي سگهجي ٿي.

(2) غلط وهڪري جي شرح سيٽنگ: صحيح وهڪري جي شرح ري سيٽ ڪري سگهجي ٿو.

(3) غلط وهڪري جو تناسب: وهڪري جي مختلف تناسب جي viscosity انڊيڪس مختلف آهي، ۽ وڌيڪ viscosity سان وهڪري جي لاڳاپيل سسٽم جو دٻاء پڻ وڏو آهي.جيڪڏهن ممڪن هجي ته، گهٽ ويسڪوسيٽي سولوينٽس کي تبديل ڪري سگهجي ٿو يا ٻيهر سيٽ ۽ تيار ڪري سگهجي ٿو.

(4) سسٽم پريشر صفر drift: صفر سطح جي سينسر کي ترتيب ڏيو.

2، دٻاء تمام گهٽ آهي (1) عام طور تي سسٽم جي رسي جي سبب آهي.ڇا ڪجي: هر ڪنيڪشن کي ڳولھيو، خاص طور تي ڪالمن جي ٻنهي سرن تي انٽرفيس، ۽ ليکي واري علائقي کي سخت ڪريو.پوسٽ کي هٽايو ۽ PTFE فلم کي مناسب قوت سان مضبوط يا لڪايو.

(2) گئس پمپ ۾ داخل ٿئي ٿي، پر دٻاء عام طور تي هن وقت غير مستحڪم آهي، بلند ۽ گهٽ.وڌيڪ سنجيده، پمپ سيال جذب ڪرڻ جي قابل نه ٿيندو.علاج جو طريقو: صفائي جو والو کوليو ۽ 3 ~ 5ml / منٽ جي وهڪري جي شرح تي صاف ڪريو.جيڪڏهن نه، هوائي بلبل هڪ وقف سوئي ٽيوب استعمال ڪندي نڪرڻ واري والو تي تيار ڪيا ويا.

(3) موبائيل فيز آئوٽ فلو ناهي: چيڪ ڪريو ته ڇا رزروائر جي بوتل ۾ موبائيل فيز آهي، ڇا سنڪ موبائيل فيز ۾ وسريل آهي، ۽ ڇا پمپ هلي رهيو آهي.

(4) حوالو والو بند نه ڪيو ويو آهي: حوالو والو بند ٿيڻ کان پوء بند ڪيو ويو آهي.اهو عام طور تي 0.1 تائين وڃي ٿو.~ 0.2mL / منٽ ريفرنس والو کي بند ڪرڻ کان پوء.

خلاصو:

هن مقالي ۾، صرف عام مسئلا مائع ڪروميٽوگرافي ۾ تجزيو ڪيو ويو آهي.يقينا، اسان جي عملي درخواست ۾، اسان کي وڌيڪ ٻين مسئلن سان منهن ڪنداسين.غلطي کي سنڀالڻ ۾، اسان کي هيٺين اصولن تي عمل ڪرڻ گهرجي: فرضي عنصر ۽ مسئلي جي وچ ۾ تعلق کي طئي ڪرڻ لاء هڪ وقت ۾ صرف هڪ عنصر کي تبديل ڪريو؛عام طور تي، جڏهن مسئلا حل ڪرڻ لاء حصن کي تبديل ڪرڻ، اسان کي ڌيان ڏيڻ گهرجي ته ختم ٿيل برقرار حصن کي واپس رکڻ لاء فضول کي روڪڻ لاء؛سٺي رڪارڊ جي عادت ٺاهڻ غلطي جي سنڀال جي ڪاميابي جي ڪنجي آهي.نتيجي ۾، جڏهن HPLC استعمال ڪندي، اهو ضروري آهي ته نموني جي علاج تي ڌيان ڏيڻ ۽ مناسب آپريشن ۽ سامان جي سار سنڀال.