فاسفورڪ اسيد پيپٽائيڊ جي سمجھ

اهو زندگي جي عملن ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو، فاسفوريليٽنگ ٽائر، سير، ٿر، پيپٽائڊس تي واقع آهي.فاسفوريلڊ امينو اسيد عام طور تي فاسفورڪ ايسڊ پيپٽائڊ جي پيداوار ۾ استعمال ٿيندو آهي، في الحال واحد فينيل فاسفوريلڊ امينو اسيد ۾ استعمال ٿيندو آهي.HBTU/phosphorylated amino acids عام طور تي استعمال ڪيا ويندا آھن فاسفوريليٽڊ امينو اسيد HOBt/DIEA طريقي سان ڳنڍڻ لاءِ، پر فاسفورڪ ايسڊ پيپٽائڊ ھن نقطي نقص کي چونڊي رھيا آھن، خاص طور تي پيدا ٿيل گھڻو ڊگھي پيپٽائيڊ پيپٽائيڊس يا امينو اسيد فاسفيٽ ۾، ڳنڍڻ جي ڪارڪردگي گھٽ آھي، آخري پيداوار جي پاڪائي.هن phosphopeptide لاء، اسان هڪ چونڊيو پوسٽ فاسفوريليشن جو طريقو سمجهيو.نسل جو عمل امينو اسيد سائڊ-چين حفاظتي گروپن جي چونڊيل هٽائڻ آهي جنهن کي پيپٽائڊ سنٿيسس کان پوءِ ليبل لڳائڻ جي ضرورت آهي.Tyr لاءِ، Thr سڌو سنئون رد عمل ڪري سگھي ٿو امينو اسيد استعمال ڪندي غير محفوظ سائڊ زنجيرن سان.-Ser (trt)، مقداري طور تي 1٪ TFA / DCM ماحول تي هٽايو ويو.

فاسفوريليشن، ڊبل بينزين فاسفائيٽ فاسفورامائيڊ ۽ چار نائٽروجن سان ٺاهيا ويا آهن ۽ فاسفورامائيڊ tetrazolium فعال وچولي، هائيڊروڪسي سان ڳنڍيل آهن، پوء تيزاب پرڪسائيڊ آڪسائيڊشن فاسفوريل ٺهڻ، مڪمل ردعمل جي تحت.

في الحال، peptide phosphorylated ترميمي طريقو اتي ٻه مکيه قسم آهن:

(1) پوليپيپٽائيڊ جي ترتيب ۾ اعتدال جي ضمانت واري فاسفوريليٽ امينو اسيد جو سڌو تعارف؛

(2) پيپٽائڊ جي ترتيب تي پيدا ٿيندڙ رال کان پوءِ، پاسي واري زنجير هائيڊروڪسيل جي Ser، Tyr، يا Thr phosphorylation ڏانهن.

1) وچولي گارنٽي فاسفوريلائيڊ امينو اسيد سڌو سنئون پيپٽائڊ تسلسل متعارف ڪرايو:

اهو آهي، امينو اسيدز جن کي فاسفوريليٽ ڪرڻ جي ضرورت آهي انهن کي فاسفوريليٽ ڪيو ويندو ۽ مناسب طور تي محفوظ ڪيو ويندو اڳ ۾ استعمال ڪندي (Thr، Ser يا Tyr)، ۽ پوء فاسفوريليشن کي عام SPPS نسل جي عمل جي بنياد تي پوليپيپٽائيڊ انڊيڪس جي چونڊ پوائنٽ تائين محدود ڪيو ويندو. .هن طريقي کي هلائڻ لاء آسان آهي، peptide enterprises phosphorylated ترميمي جو مکيه طريقو بڻجي چڪو آهي.

2) پيپٽائڊ جي ترتيب تي پيدا ٿيندڙ رال کان پوء، Ser hydroxy phosphorylation، Tyr، يا Thr پاسي واري زنجيرن ڏانهن:

فاسفوريليشن ڊيڪوريشن جو استعمال ڪندي فاسفوريليشن هڪ واحد ڪنڪريشن جي فاسفوريليشن کي پوليپيپٽائيڊ طريقي سان، پاسي واري زنجير جي سجاڳي ۾ وڏي گروهن پاران پيدا ٿيندڙ اسٽرڪڪ رڪاوٽ جي ڪري، امينو اسيد جي فاسفوريليشن کي پيپٽائيڊ زنجير سان ڇڪڻ ڏکيو آهي.مستقبل ۾، امينو اسيد جو تعارف وڌيڪ ڏکيو ٿيندو، خاص طور تي ڪيترن ئي فاسفوريليشن سائيٽن تي مشتمل سجاڳي ۾، نسل انتهائي ڏکيو ٿي ويندو، حتمي پيداوار جي جوڙجڪ پيچيده، الڳ ڪرڻ ڏکيو، ۽ پيداوار انتهائي گهٽ آهي.

تنهن ڪري، جڏهن پيپٽائيڊ زنجير ۾ ڪيترن ئي سائيٽن کي فاسفوريليٽ ڪيو ويندو آهي، هڪ چونڊ ڪري سگهي ٿو پيپٽائڊ جي ترتيب کي رال تي پيدا ڪرڻ ۽ پوء ان کي فاسفوريليٽ سائڊ چين هائيڊروڪسيل گروپ جي Ser، Tyr، يا Thr ذريعي: ان جي نسل ۾ بنيادي طور تي شامل آهي چونڊيل هٽائڻ. پاسي واري زنجير حفاظتي گروپ جنهن کي پيپٽائڊ جي ٺهڻ کان پوءِ امينو اسيد جي سڃاڻپ جي ضرورت آهي.Tyr لاء، Thr سڌو سنئون استعمال ڪري سگھي ٿو امينو اسيد سائڊ زنجيرن جي جواب ۾ محفوظ نه آھن.

پاسي واري زنجير جي حفاظت جو بنياد 1٪ TFA / DCM ماحول مقداري طور تي ختم ڪري سگھجي ٿو.جڏهن هي طريقو چونڊيو وڃي ٿو، هڪ فاسفورامائڊائٽ ٽيٽرازوليم فعال وچولي ٺاهي سگهجي ٿو، ڊيبينزائل فاسفورامائڊائٽ ۽ ٽيٽرازوليم استعمال ڪندي، هڪ هائيڊروڪسيل گروپ سان ڳنڍيل آهي، ۽ پوء آڪسائيڊائز ڪري هڪ فاسفوريل گروپ ٺاهڻ لاء پيرو آڪسائيڊ ماحول ۾ رد عمل کي مڪمل ڪرڻ لاء.